Kalp inceleme birimi hamilton sağlık bilimleri,

Anestezi altında fare kalpler dördüncü interkostal uzayda externalized. Daha sonra kodlama belirli genler bir şırınga vivo içinde görüntüleme ve Batı ile protein ifade ölçü tarafından takip Miyokardiyum içine enjekte edildi adenovirüse bakın analiz leke. Abstract Gene manipülasyon özellikle kalbinde önemli ölçüde soruşturma kalp hastalığı pathomechanisms ve tedavi potansiyellerini artırmak.

Burada açıklanan protokol sıralaması için gerekli karmaşık iş akışı ve hastalık katkıda genetik varyantların tanımlamak için kullanılan Biyoinformatik işlem sunar.

Vivo kalp özel gen teslim sık sistemik veya yerel teslim tarafından elde edilir. Kuyruk ven yoluyla sistemik enjeksiyon kolay ve verimli kardiyak gen ekspresyonu rekombinant adeno ilişkili virüs 9 AAV9 kullanarak işleme.

Ancak, bu yöntem için verimli iletim vektör nispeten yüksek miktarda gerektirir ve nontarget organ gen iletim neden olabilir. Burada, intramyocardial enjeksiyon vivo içinde kalp özel gen manipülasyon farelerde için bir basit, etkili ve zaman kazandıran yöntemi açıklanmaktadır. Anestezi havalandırma olmadan altında göğüs birincil ve ikincil kasları açık açık disseke ve fare kalp hızlı bir şekilde dördüncü interkostal alan küçük bir kesi yoluyla el ile dışa tarafından maruz kalmış.

Sonraki vivo içinde görüntüleme bu luciferase özellikle kalbinden başarılı bir şekilde overexpressed gösterdi. Ayrıca, Western blot analizi başarılı overexpression veya fare kalbinde VDR susturmak doğruladı.

Kez hakim, bu teknik gen manipülasyon yanı sıra enjeksiyon hücreleri veya fare kalbinde nanogels gibi diğer malzemeler için kullanılabilir. Introduction Log in or Start trial to access full content. Miyokard İnfarktüsü ve kalp yetmezliği gibi ölümcül kalp sorunları için etkili tedavi stratejileri eksikliği temel pathomechanisms yoğun keşfi ve kimliği roman tedavi olanakları3çekiyor.

Bu bilimsel keşifler için yaygın olarak kullanılan4,5kalp özel gen manipülasyon olduğunu.

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

Genom düzenleme kesin ve kronolojik zamanmekansal genom değişiklikler yaşayan fareler sağlar rağmen hala bir zaman alıcı ve emek yoğun pratik6olduğunu.

Alternatif olarak,6kalp özel gen manipülasyon virüs vektör veya küçük müdahale RNA siRNA karmaşık teslim rutin tarafından gerçekleştirilen. Virüs vektör teslim yetişkin fare kalp için kabaca iki stratejileri ile elde edilir: sistemik veya yerel enjeksiyon.

AAVs Kalp inceleme birimi hamilton sağlık bilimleri gibi cardiotropic serotip sistemik enjeksiyon noninvaziv kardiyak belirli bir gen manipülasyon7için.

You might already have access to this content!

Ancak, bu yöntem vektör verimli iletim ve gen ekspresyonu için gerekli nispeten yüksek miktarda gerektirir ve kas ve karaciğer7gibi nontarget organların kalp inceleme birimi hamilton sağlık bilimleri iletim neden olabilir. Yerel virüs enjeksiyon intramyocardial enjeksiyon veya intrakoroner teslim7tarafından sağlanır. İntrakoroner teslim virüs intramyocardial enjeksiyon için karşılaştırıldığında kalp içinde daha eşit dağılımı yol açar.

Ancak, bu teknik dezavantajları sistemik dolaşım ve iletim nontarget organları8ve onun gereksinimi için basınç ölçüm işlemi sırasında aygıt için viral vektörler dışarı hızlı yıkama vardır. Buna karşılık, viral olarak dağıtabilmenizi daha iyi virüs saklama Miyokardiyum yanı sıra site belirli teslim, ama başarısız intramyocardial enjeksiyon sağlar7vektör.

Küçük hayvanlar için intrakoroner teslimat sistemik AAV9 enjeksiyon ve intramyocardial enjeksiyon daha yaygın olarak kalp inceleme birimi hamilton sağlık bilimleri yapmak teknik olarak zor olur.

Before you can use the favorites feature you must sign in or create an account.

Sistemik enjeksiyon gerçekleştirmek kolay olsa da, geleneksel intramyocardial enjeksiyon mekanik havalandırma ve Torakotomi gerektiren, geniş doku hasarına neden olur ve zaman alır. Bu raporda, intramyocardial enjeksiyon için bir kolay, zaman tasarrufu ve yüksek verimli yöntemi açıklanmıştır.

Kalp Yetmezliği Nedir? (Fen Bilimleri) (Sağlık ve Tıp)

Hakim sonra gene manipülasyon, aynı zamanda hücreleri ve fare kalp diğer maddeleri enjeksiyonu için bu yöntem kullanılabilir.

Subscription Required.

• Остановившись у края люка, Сьюзан посмотрела .
• Ateşle yüksek tansiyon tedavisi
• Ненавидел американскую еду, американские нравы, но более всего ему было ненавистно то, что американцы железной хваткой держали мировой рынок компьютерных программ.
• Две эти команды разделяло меньше одной минуты, но она была уверена, что разговаривала с коммандером больше минуты.

Please recommend JoVE to your librarian. Protocol Log in or Start trial to access full content.

•  - Элементы, ответственные… У Дэвида Беккера, находившегося в трех тысячах миль от комнаты оперативного управления, загорелись .
• Tıbbi Birimlerimiz - Özel Su Hospital
• Yüksek tansiyon durumunda lavman
• Медсестра была уже совсем близко и что-то кричала Беккеру по-испански, но он ничего не слышал.
•  - Приблизительно через час любой третьеклассник с модемом получит высший уровень допуска к американской секретной информации.

Adenovirus çözüm hazırlanması Arıtılmış adenovirus çözüm gelişinden sonra çözüm ° C dondurucuda saklayın. Not: Adenovirus enjeksiyon uygulanabilir farelerde gerçekleştirildi. Kalp inceleme birimi hamilton sağlık bilimleri sağlamlılık, steril eldiven ve steril elbise giy. Laminar akış steril başlık, Hamilton şırınga 30 G iğne eki tarafından takip bir iğne olmadan Hamilton şırınga kullanarak 50 µL adenovirus çözüm Aspire edin.

Şırınga 30 G iğne ile yukarı doğru tutun ve iğne iğne ucu ilk çözüm Damlalar görünümünü tarafından teyit adenovirus Çözümle doldurulana kadar şırınga pistonu yavaşça itin. Not: Bu 30 G iğne doldurmak için yaklaşık 45 µL çözüm alır hemen hemen hiçbir çözüm şırıngada görünür şimdi.

2. Шум генераторов внизу с каждой минутой становился все громче.
3.  Вирус? - снисходительно хмыкнул Стратмор, - Фил, я высоко ценю твою бдительность, очень высоко.
5. Yüksek tansiyon koroner arter hastalığı diyeti

Dikkatli bir şekilde başka bir 30 µL adenovirus çözüm Aspire için yukarıdaki hazır şırınga kullanın ve sonraki kullanım için buz üzerinde gevşek kepli şırınga yerleştirin. Vana açacağız ve oksijen isoflurane Buharlaştırıcı oksijen tankı akış. Yeterli anestezi ayak çimdik yanıt yokluğunda tarafından onaylayın.

Steril oftalmik krem kurumasını kornealar korumak için her göz için geçerlidir. Göğüs ve üst karın tıraş. Cerrahi sitesi sol alt kısmında göğüs iyot-klorheksidin dayalı antiseptik örneğin entoiodine 3 scrubs ile sterilize.

Steril örtü ile cerrahi sitesi kapak. Intramyocardial enjeksiyon Adenovirus fare kalbinde Eldivenleri çıkarma ve steril eldiven yenisini koymak. Açık açık göğüs büyük ve küçük göğüs kasları forseps ve bir mikro-sivrisinek hemostat ile incelemek. İnterkostal alanlarda ortaya çıkarmak büyük göğüs ve göğüs küçük kasları geri çeker. Aracılığıyla işlemek ve dördüncü interkostal boşluk veya geniş interkostal boşluk gözlem ile bir mikro-sivrisinek hemostat ile açın.

Kalp kalp sigara dominant el parmağı ile hafifçe göğüs duvarında sağ tarafına basarak yansıtmak için belgili tanımlık kesme doğru itin. Yavaşça externalized kalp sigara dominant el başparmak ve işaret parmağı ile güvenli.

Toplam 30 µL adenovirus çözeltinin dominant el ile üç siteleri ventral, dorsal ve lateral duvarına sol ventrikül adenovirus şekil 1 c ile dolu Hamilton şırınga üzerinden sol ventrikül Miyokardiyum içine enjekte et. Enjeksiyon tamamlanmasından sonra hemen geri İntratorasik uzaya kalp yerleştirin.

You might already have access to this content!

El ile göğüs duvarı cilt kesi site doğru yavaşça basarak İntratorasik uzayda hava tahliye edin. Not: Başarılı hava tahliye büyük göğüs ve göğüs küçük kasları tarafından sınırdışı hava neden çırparak tarafından kanıtlanan.

Он не собирается выдавать ключи от директорского кабинета всякий раз, когда Мидж придет в голову очередная блажь. Не успел он приняться за чтение отчета службы безопасности, как его мысли были прерваны шумом голосов из соседней комнаты. Бринкерхофф отложил бумагу и подошел к двери. В приемной было темно, свет проникал только сквозь приоткрытую дверь кабинета Мидж.

Deri yatay Dikiş dikiş ipek sütür ile yakın. Not: Büyük göğüs ve göğüs küçük kasları, onlar sadece açık açık disseke ve onların anatomik yapıları işlemi arada olmadığından sütüre değil.

İşlemden sonra hemen tamamen iyileşti kadar fareler bir ısı yastık 37 ° C üzerinde korumak. Tamamen kurtarır sonra fareyi kafese geri getirin. Sterilize 30 G şırınga iğne "Sharps" kap içinde toplamak. Çözüm 0. Görüntüleme sistemi açın. Otomatik görüntüleme sistemi kendi kendini sınama sonra "Işıklı" olarak görüntüleme modunu seçin ve aşağıdaki ayarları yapın: pozlama: otomatik; Binning: 8; FStop: 1; Uyarma: Blok; Emisyon: açık.

İmzalat fareler bir ısıtmalı görüntüleme sahnede kamera doğru yönetmen göğüs ile yüzükoyun sígara güvenli. Görüntüleri her fare için 1 resim toplamak ve göğüs aynı dairesel ölçüm bölgeleri ROI ilgi çizerek sinyalleri yoğunluğunu ölçmek. Fotoğraf topluluğu sonra farelerin kurban ve aşağıdaki bölümünde belirtildiği gibi dokularda toplamak. Ventral Ensizyon ön boyun olun. Şu ortak Karotid arter omohyoid ve boyun kasları geri çeker tarafından maruz. Fareler şu ortak Karotid arter transecting ve kan boşaltılmasına kurban.

Ventral Ensizyon karın içinde olun.

Before you can use the favorites feature you must sign in or create an account.

Göğüs kafesi midclavicular hattı boyunca her iki kaburga kesme ve diyafram transect. Kalp xiphoid kaldırarak maruz. Artan aort bulmak ve Perivasküler yağ dokusu yavaşça çıkarın. Aort cannulate ve retrogradely 0. Perfüzyon sonra kalp tüketim ve sol ve sağ ventrikül bölmek.

Karaciğer, akciğer ve dalak tüketim. Soğuk PBS 4 ° C olarak iki yıkamadan sonra toplanan dokulara sıvı azot kriyojenik şişeleri ayrı ayrı saklayın. Protein ifade tespiti Homojenizasyon arabellek piyasada bulunan lizis arabellek 1: oranında içine proteaz inhibitörü kokteyl ekleyerek hazırlayın.

İşlenecek örnekleri sayısına göre Toplam hacim hesaplamak. Hazırlanan homojenizasyon arabellek sonraki kullanım için 4 ° C'de tutun. Sıvı azot tankı dokulardan dışarı çıkar.

Yüksek hassasiyetli ölçeklerde yaklaşık 60 mg doku her kalp sağlığı ipuçları gerçekler eğitimi için anjina pektorisin arka planında yüksek tansiyon tartın.

Doku için yeni bir 1.

Hemen µL homojenizasyon tampon ve precooled 1. Precooled 4 ° C microcentrifuge tüplerde otomatik bir doku Bileme Makinası metal sahipleri güvenli ve aşağıdaki ayarlarla makine başlatarak homojenizasyon başlamak: frekans: 70 Hz; süre: s. Homojenizasyon sonra homogenate Yükleme eklemek tampon çözüm 5 x süpernatant protein oranı ve 5 min için ° C'de protein denatüre. Kalp ve diğer organ dokulara protein ifade seviyelerinde daha da Western blot analizi -den sonuçlanmak göstermek şekil 2C ve şekil 3temsilcisi tarafından izlenen protokole göre daha önce12açıklanan.

Representative Results Log in or Start trial to access full content.

 Северная Дакота, - вслух произнесла она, пытаясь своим умом криптографа проникнуть в скрытый смысл этого имени.  - Что говорится в его посланиях на имя Танкадо. - Понятия не имею. КОМИНТ засек лишь исходящую почту. В данный момент мы ничего не знаем про Северную Дакоту, кроме анонимного адреса.

İntramyocardial enjeksiyon adenovirus kodlama luciferase Adv-luc sonra 5 gün, adv-luc enjekte farelerde Imaging vivo içinde kalbinde olan özellikle şekil 2A, Bluciferase sağlam overexpression belirtti. Buna karşılık, herhangi bir luciferase ifade kalp inceleme birimi hamilton sağlık bilimleri farelerde algılandı.

Adenovirus sadece sol ventrikül Miyokardiyum enjekte edildi çünkü aksine, VDR ifade önemli ölçüde ne adv-VDR enjekte fareler veya adv-shVDR enjekte fareler şekil 3 c, Dsağ ventrikül içinde değiştirilmedi.

Resim 1. Şema için fare intramyocardial enjeksiyon ve gen ifade Algılama Protokolü.